因標本中一般同時存在較高濃度的IgG抗體，后者將競爭結合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結合到固相上。因此如用抗ELISA試劑盒人IgM作為二抗，ELISA試劑盒間接測定IgM抗體，必須先將標本用A蛋白或抗IgG抗體處理，以除去IgG的干擾。
在臨床檢驗中測定抗體IgM時多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相，以捕獲血清標本中的IgM(其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然后加入抗原，此抗原僅與特異性IgM相結合。繼而加酶標記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用，ELISA試劑盒呈色即與標本中的IgM成正相關。此法常用于病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒(HAV)抗體的檢測模式見圖2-7。類風濕因子(RF)同樣能干擾捕獲包被法測定IgM抗體，導致假陽性反應。生物素為小分子化合物，分子量244。用化學方法制成的衍生物素- 羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質和糖等多種類型的大小分子形成生物素標記產物，標記方法頗為簡便。
其親和力較抗原抗體反應大得多，兩者一經結合就極為穩定。由于一個親和素可與 4個生物素分子結合，因此如把ABS與ELISA試劑盒法可分為酶標記親和素-生物素(LAB)法和橋聯親和素-生物素(ABC)法兩種類型。兩者均以生物素標記的抗體(或抗原)代替原ELISA試劑盒系統中的酶標抗體(抗原)。在LAB 中，固相生物素先與不標記的親和素反應，然后再加酶標記的生物素以進一步提高敏感度。在早期，親和素從蛋清中提取，這種卵親和素為堿性糖蛋白，與聚苯乙烯載體的吸附性很強，用于ELISA試劑盒中可使本底增高。從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點，在ELISA試劑盒應用中有替代前者的趨勢。由于ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩種試劑，增加了操作步驟，在臨床檢驗中ABS-ELISA應用不多。
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