細節決定成敗，這對于試驗室科研工作者來說也是如此。在ELISA試劑盒試驗中的各項操作細節有很多，如盡量少用排槍、勤換槍頭，加樣時由低濃度向高濃度加，因為這樣可以削減跳孔的幾率。而整個試驗的*后關鍵就是結果的處理辦法了，那么在在今日的技術文章中，上海通蔚生物試驗為您帶來的是ELISA試劑盒檢測結果剖析辦法。
①：ELISA試驗中樣品都要做復孔或三孔，然后核算每個濃度規范品的平均OD值，復孔的變異系數應該小于20%。
②：平均OD值減去空白孔的OD值。
③：制造規范曲線。
以減去本底后的OD值為X軸，規范品的濃度為Y軸，運用作圖軟件得出一個合適的核算辦法。主張運用合適的軟件來作圖，比方CurveExpert 1.4。這款軟件可以給出很多種辦法(比方直線、半對數、對數、四參數方程等)并從中選擇一條*合適的方程。要想查驗某條曲線是否與表中數據吻合，可以將規范品的濃度作為未知數，將對應的OD值帶入該方程，核算出規范品的濃度，得到的結果應該與實踐濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度*的那條曲線。
如果出現規范曲線的線性欠好，或平行性欠好(雙孔對照孔的OD值不同很大)，或出現跳孔的現象，可能引起的原因有酶標板孔間相互污染、洗板后未能盡快進行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的辦法不對、孵育位置避光性欠安或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸騰、酶標板孔問參加的試劑量不同，相對應的解決辦法是加樣時請當心勿將液體濺人另一孔中，人工洗板時也請當心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入，切記勿將槍頭接觸到板孔內，吸取不同試劑瓶中的液體時就要替換一次槍頭、確認孵育環境不透光，蓋板膜將酶標板密封好、運用已校正過的微量加樣器，如將*次參加液體時槍頭上留有一滴的液體滴下，那么將今后槍頭上留有的液體也滴下，以確保參加液體體積的共同性。
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